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电子顺磁共振波谱耗材配件
DMPO自由基捕获试剂
DMPO自由基捕获试剂


应用:用于捕获自由基,如羟基自由基、超氧自由基、烷基自由基、硫酸根自由基等

货号:D048

规格:0.2ml ; 1ml

关键词:DMPO、自由基捕获剂


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产品描述

活性氧具有调节许多重要细胞功能的作用,它和人体衰老、多种人类疾病,如癌症、糖尿病有关。自旋捕 捉 ESR 技术是一种检测活性氧的办法,他能提供具有特征的 ESR 的信号。DMPO 采用一种特殊的敏感方法,可以捕捉超氧阴离子和羟自由基,分别产生 ESR 光谱。因此,它是探测生物系统内ROS的强有力工具。


自由基捕获剂,中文名称5,5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物,可以通过与自由基结合生成衍生物而延长自由基的存在时间,方便利用ERP设备检测。DMPO可以捕获包括羟基、超氧、烷基等在内的绝大多数自由基,适用于环境、化学、材料等多种研究方向。相较于市面其他同类产品纯度更高,不需要提纯即可直接进行实验,保存时间长,不易变质。



常规参数

名称:5,5-Dimethyl-1-pyrroline N-oxide

性状:无色液体 

纯度:≥99% (GC) 

分子量:113.16,C6H11NO 

保存条件:-20℃,防潮,避光 

运输条件:蓝冰 

CAS号:3317-61-1




纯度对比

没有杂质(*)检出

S/N比率对比

以羟自由基的Fenton反应(黑色)和空白(蓝色)为例:峰清晰,S/N比例高




基本步骤

常规检测步骤(*本数据仅供参考,具体参数可能因仪器厂家的不同而适当调整) 

超氧阴离子清除活性的检测 

(1) 将 15 μl 的 DMPO 溶液和 50 μl 的 5 mM 的次黄嘌呤加入到 35μl 的 0.1 M 的磷酸盐缓冲液(pH 7.8)中。 

(2) 加入 50 μl 的待测 SOD 标准品或待测样品,涡旋振荡 1-2 秒。

(3) 加入 50 μl 的 0.4 U/ml 的黄嘌呤氧化酶之后立即涡旋振荡。 

(4) 放置一段时间(例如 1 min)将溶液转入 ESR 样品管中检测。

(5) 通过峰值计算相对强度(DMPO-O2 - /Mn2+)



C-,N-,S-基自由基的检测

基本流程 

1、制备100mM含有25μM 的磷酸盐缓冲液(pH 7.4)。

2、制备以下过氧化物酶底物:(A)100mM甲酸钠(HCOONa);(B)100 mM 氰化钾(KCN);(C)100mM叠氮钠(NaN3);(D)含有100mM亚硫酸钠 (Na2SO3)的100mM磷酸盐缓冲液(pH 7.4)。 

3、制备4.0mg/ml(~100μM)的辣根过氧化物酶溶液和1mM H2O2溶液。

4、制备浓度为1M的DMPO溶液。

5、准备总体积为200μl的所需反应混合物。在离心管中加入130μl的缓冲液。

6、加入20μl之前准备的1M的DMSO溶液,再加入20 μl底物储存液,10 μl的1mM H2O2溶液,最后加入20μl HRP触发反应。 

7、涡旋振荡离心管,加入到进样系统中,检测谱图。

8、各物质的终浓度为:100mM DMPO,10mM的底物,50μM H2O2, 10μM HRP。


超氧阴离子操作流程

基本流程 

1、制备100mM含有25 μM的磷酸盐缓冲液(pH 7.4)。

2、制备100mM含有1mM次黄嘌呤的磷酸盐缓冲液(pH 7.4) 。

3、制备浓度为1 U/ml的黄嘌呤氧化酶溶液。

4、制备浓度为1 M的DMPO溶液。

5、准备总体积为200 μl的所需反应混合物。在离心管中加入130 μl的 缓冲液。

6、在离心管中加入70 μl缓冲液。再加入20 μl之前配备的1M DMPO 溶液以及100 μl的1mM次黄嘌呤保存液。 

7、加入10 μl的黄嘌呤氧化酶触发反应,涡旋振荡离心管后将溶液转移至进样系统中。

8、加样后调节光谱并得到谱图。各物质的浓度为:100mM DMPO,0.5 mM黄嘌呤氧化酶,0.05 U/ml黄嘌呤氧化酶。



应用

用于捕获自由基,如羟基自由基、超氧自由基、烷基自由基、硫酸根自由基等。


货号

D048


规格

0.2ml ; 1ml


关键词:DMPO、自由基捕获剂

 



应用

用于捕获自由基,如羟基自由基、超氧自由基、烷基自由基、硫酸根自由基等。



规格是1ml/瓶。

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