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LS18纪实:光片显微镜下的真相!

发布日期:2021/2/20 15:29:21

长久以来,对物理切片的生物样本进行观察,是生物科学家们获取组织内生物信息的主要方式。然而,随着科研工作者们越来越深入的科学研究,目前对于组织三维结构信息探索的需求越来越大。例如:在神经系统相关的研究中,由于大多数神经元向多个方向延伸,而薄薄的切片无法获知整个神经系统的真实结构[1]。



下图小鼠脑成像:100um切片(左)整脑(右)(best365体育拍摄)




获取三维的结构信息,一种方式是通过连续的组织切片,通过数据重建得到三维结构信息,但由于组织被撕裂、拉伸引起的变形和损失,这种方法很有挑战;另一种方式,即结合组织透明化技术,对完整组织进行成像观察,从而获取其整个系统的结构信息。


生物组织内多种多样的物质会造成不利于成像的光散射与光吸收,这限制了深入组织内部的光学成像。近年来,随着组织透明化技术[2,3]与光片显微技术[4]的相继发展,使得对完整组织进行三维成像成为可能。


CLARITY透明化方法(Karl D, et al. 2013)


PEGASOS透明化方法(Hu Z, et al. 2018)



由best365体育研发的LS18平铺光片显微镜[4],通过快速平铺短而薄的光片,实现大视野成像且不损失空间分辨率,从而达到比传统光片显微镜更先进的快速、多色三维成像。



平铺光片技术示意图(Liang G, et al. 2015)




此外,由于组织透明化技术的多样性,科研工作者可以根据研究目标选取适合的透明化方法,LS18平铺光片显微镜对组织透明化方法均兼容。




视频连接:


https://v.qq.com/x/page/e3228hrj8c4.html?sf=uri

小鼠脑成像,PEGASOS透明化,6.3x拍摄




https://v.qq.com/x/page/d3228ykdcoo.html?sf=uri

小鼠脑干成像,uDISCO透明化,6.3x拍摄



https://v.qq.com/x/page/w32285l3y59.html?sf=uri

小鼠脑100um光学切片提取,PEGASOS透明化,4x拍摄



https://v.qq.com/x/page/a3228qkmlap.html?sf=uri

小鼠卵巢成像,Scales透明化,12.6x拍摄





目前,best365体育LS18显微镜已为许多高校、研究机构等老师提供科研服务,自19年投入市场以来,已公开发表论文一篇[5],投稿/编辑中的科研论文十余篇。科研服务主要涉及主动式/被动式组织透明化、主动式/被动式免疫标记、LS18光片显微成像、数据处理及分析与数据存储等。





除小鼠脑的其它样本成像结果展示:







参考文献:



[1]Ueda HR, Ertürk A, Chung K, et al. Tissue clearing and its applications in neuroscience[J]. Nat Rev Neurosci, 2020, 21(2):61-79.

[2]Chung K, Wallace J, Kim SY, et al. Structural and molecular interrogation of intact biological systems[J]. Nature, 2013, 497(7449):332-337.

[3] Jing D, Zhang S, Luo W, et al. Tissue clearing of both hard and soft tissue organs with the PEGASOS method[J]. Cell Res. 2018, 28(8):803-818.

[4] Gao L. Extend the field of view of selective plan illumination microscopy by tiling the excitation light sheet[J]. Opt Express, 2015, 23(5):6102-6111.

[5] Chen Y , Li X , Zhang D , et al. A Versatile Tiling Light Sheet Microscope for Cleared Tissues Imaging[J]. Cell Rep. 829267, 2020





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